環境微生物監測標準操作規程

（一）監測指征

1、感染暴發或感染流行時，懷疑與環境（jìng）因素有關時。

2、監測（cè）潛在的危險環境狀況，證明有危險的病原（yuán）體存在或證明（míng）危（wēi）險的（de）病原體已被成功清除。

3、當（dāng）某（mǒu）項感染控製措施改變時，評估其效果；或者根據規範要求，儀（yí）器設備或係統啟用時監測。

4、目（mù）標性（xìng）監測的需要（yào）。

5、循證（zhèng）醫學證據支持。

（二）空氣（qì）監測(沉降法)

1、采樣時間：消毒處理後、進行醫療（liáo）活動（dòng）之前。

2、采（cǎi）樣高度：距地麵垂直高（gāo）度80～150cm。

3、采樣點設置

1）非潔淨房間：室內麵積≤30㎡，在對角線上設裏、中、外3點（diǎn）。裏（lǐ）、外兩（liǎng）點（diǎn）位置各（gè）距牆1m；室內麵積>30㎡，設東、西（xī）、南、北、中5點。其中東、西、南、北4點均（jun1）距牆1m。將9cm直徑（jìng）普通營養瓊脂（zhī）平板（bǎn）放置各采樣點，采樣時（shí）將平皿打開，扣放在平皿旁，暴露規定時間後，蓋上平皿（mǐn）蓋及時送檢。

2）潔淨房間：清潔房間在空態或靜態條（tiáo）件下，根據房間的不同清潔級別進（jìn）行布（bù）點，操作按照GB/50333—2002。9cm直徑普通營養瓊脂（zhī）平（píng）板在采樣（yàng）點暴露（lù）30min後（hòu）送檢培養。

4、采樣注意事項

1）采樣前，關閉門窗，消毒後在無人走動的情況下，靜止10 min後（hòu）采（cǎi）樣。

2）采樣（yàng）人員做好（hǎo）手部衛生，佩戴口罩、帽子等個（gè）人防護裝備。

3）平皿蓋打開順序應先內後外；手臂及頭不可越過培（péi）養皿上方；行走及放置動作要輕，盡量減少對空氣流動狀態的影（yǐng）響；平皿蓋應扣放，以防汙染。

4）采樣結束後，由外向內（nèi）合上（shàng）平（píng）皿蓋。

5）采樣完畢的培養皿應及時送達（dá）細菌室。

5、細菌室（shì）檢測

1．培養皿在37℃培養（yǎng）48h後，進（jìn）行菌落計數和致病菌檢驗。

(1）普（pǔ）通營（yíng）養瓊脂培養基的配製按照GB／—2003；

(2)菌落計（jì）數方法按照2012年8月1日實施《醫療機構消毒技術規範》要求：沉降法按平均每皿（mǐn）的菌落數報告（gào）：cfu/（皿.暴露時間）；

(3)致病菌檢（jiǎn）驗：溶血性鏈球菌檢驗按照GB／—2003，沙門（mén）菌檢驗按照CB/—2003，銅綠（lǜ）假單（dān）胞菌檢（jiǎn）驗按照GB／—1987，金黃色葡萄（táo）球菌檢驗按照CB/—1987。

6、結果判斷：

1）潔淨手術部和其他潔淨（jìng）場（chǎng）所：空氣中的細（xì）菌（jun1）菌落總數要求應遵循GB/50333規定（dìng）。

2）非潔淨手術室、非潔淨骨髓移植病房、產房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重症監護病房、血液病病區空氣中的細菌菌落總數≤4cfu/15min。

3）兒科病房（fáng）、母嬰同室、婦科檢查（chá）室、人流室、治療（liáo）室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應中心、血（xuè）液透析中心（室（shì））、急（jí）診（zhěn）室（shì）、化（huà）驗室（shì）、各普通病室、感染疾病（bìng）科門診及病房空氣中的細菌菌落總數（shù）≤4cfu/5min。

（三）物體表（biǎo）麵監測

1、采樣（yàng）時間：

1）消毒處理後4h內（nèi）。

2）懷疑（yí）與醫院感染暴發有關時。

2、采樣方法

被（bèi）采樣本（běn）麵積<100c㎡取全部表麵；如采樣麵積≥100c㎡，連續采樣4個位置(不可有重（chóng）疊)，每個位置采5cm×5cm的大小，用浸有無菌生理鹽水的棉拭子1支，在規格（gé）板內橫豎往返（fǎn）均勻塗擦各5次，並隨之（zhī）轉動棉拭子，將棉拭子投入10ml無菌生理鹽（yán）水（shuǐ）試管內；不規則的物體表麵，用棉拭子直（zhí）接塗擦，采樣（yàng）麵積≥30c㎡

3、實（shí）驗室檢驗

1）取1mL傾注培養，平行雙（shuāng）份。37℃培養48h，進行菌落計數和致病菌檢驗。普通營養瓊脂培養基的配製（zhì）按照GB／T4789．28—2003；菌落計數方法按照(3B／T7918．2—1987；致病菌（jun1）檢驗與空氣監測相同。

2）計算（suàn）公式：

A、規則物體表麵：細菌總數(cfu／c㎡)=(平均每皿菌落數×洗脫液稀釋（shì）倍數)／采樣麵積(c㎡。)

B、小型物（wù）體表麵：用CFU/件表示。

4、結果判斷：參照2012年8月1日實施《醫療機構消毒技術（shù）規範》。

1）潔淨手術部、其它潔淨場所、非潔淨手術部、非潔淨骨髓移植病房、產房、導管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重症監護病房、血液病病區物體表麵細菌菌落（luò）總數≤5cfu/cm².

2）兒科病房、母嬰同室、婦科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥（yào）室、輸血科、消（xiāo）毒供應中心、血液透析中（zhōng）心（xīn）（室）、急診室、化驗室、各普通病室、感染疾病科門診及病房物體表麵細菌菌落總數≤10cfu/ cm²。